今天我们来看一下双缩脲试剂,以下6个关于双缩脲试剂的观点希望能帮助到您找到想要的百科知识。
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双缩脲试剂成分
双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液。
双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/mL。
双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀，从而使试剂失效。
双缩脲试剂 怎么配？
碱性条件下，双缩脲h2n-co-nh-co-nh2可以和cu离子作用生成紫色沉淀。
灵敏度差，测定范围窄，样品需要量大，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。 干扰测定的物质包括有：在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出现红色沉淀。
配制：
双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液；双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液。
先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL，振荡均匀（营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。
具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
以上内容参考：百度百科-双缩脲试剂
双缩脲和双缩脲试剂有什么区别?
1、作用不同
斐林试剂是新配制的溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应。
2、使用方法不同
斐林试剂是在甲、乙两液等量混合后立即使用，而使用双缩脲试剂时应先加入A液1mL，摇匀，再加入B液4滴，摇匀，再观察实验现象。
3、组成成分不同
斐林试剂和双缩脲试剂虽然都由NaOH和CuS04两种成分配制而成，但是用量上还是有所不同。斐林试剂分为甲液和乙液两种，其中甲液为0.1g/mL的NaOH溶液，乙液为0•05g/mL的CuS04溶液。双缩脲试剂分为A液和B液，其中A液为0.1g/mL的NaOH溶液，B液为0.01g/mL的CuS04溶液。
注意事项：
在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜［CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠［NaOH]溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜［Cu(OH)2]沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。
以上内容参考 百度百科—双缩脲试剂、百度百科—双缩脲
双缩脲试剂的使用方法
双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液；
双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液.
先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL，振荡均匀（营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。
蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
扩展资料
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下Cu2+的与双缩脲试剂发生的紫色反应。
而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H2NOC-NH-CONHH2)结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生紫色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
参考资料来源：百度百科-双缩脲试剂
双缩脲试剂a液和b液分别是什么?
双缩脲试剂A是氢氧化钠溶液，双缩脲试剂B是硫酸铜溶液。
相关介绍：
双缩脲试剂（外文名：Biuret Reagent）是用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。
它是碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成，在遇到蛋白质时显紫色。
双缩脲试剂A是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液，双缩脲试剂B硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
先将双缩脲试剂A 3mL加入组织样液3mL，振荡均匀（必须营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。如果组织里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。
蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
以上内容参考：百度百科-双缩脲试剂
双缩脲试剂鉴别蛋白质的原理？！
蛋白质的肽键与双缩尿类似，可与铜离子在碱性环境下(双缩尿试剂)生成紫色络合物.稀氢氧化铜溶液(斐林试剂)有弱氧化性可与还原性糖中的醛基发生反应，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1 g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01 g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。
扩展资料
双缩脲反应主要涉及肽键，因此受蛋白质特异性影响较小。且使用试剂价廉易得，操作简便，可测定的范围为1～10mg蛋白质，适于精度要求不太高的蛋白质含量的测定，能测出的蛋白质含量须在约0.5mg以上。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。
双缩脲法的缺点是精确度低、所需样品量大。干扰此测定的物质包括在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出现红色沉淀。
参考资料来源：百度百科-双缩脲试剂
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